NLG-919是有效的IDO抑制剂

NLG-919(GDC-0919; Navoximod） 是一种有效的 IDO (indoleamine-(2,3)-dioxygenase) 抑制剂，Ki/EC50 分别为 7 nM/75 nM。

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NLG-919的生物活性

体外

在同种异体混合淋巴细胞反应（MLR）反应中使用表达IDO的人单核细胞来源的树突细胞（DC），Navoximod（NLG919）有效阻断IDO诱导的T细胞抑制并恢复强烈的T细胞应答，ED50 = 80 nM。 类似地，使用来自肿瘤引流淋巴结的表达IDO的小鼠DC，Navoximod在体外消除IDO诱导的抗原特异性T细胞（OT-I）的抑制，ED50 = 120nM。 Navoximod以浓度依赖性方式抑制IDO活性，EC50为0.95μM。与游离Navoximod相比，PEG2k-Fmoc-NLG（L）在抑制IDO方面活性较低（EC50为3.4μM），而PEG2k-Fmoc-NLG（S）活性最低（EC50>10μM）。与从BALB / c小鼠分离的脾细胞共培养IDO +肿瘤细胞导致T细胞增殖的显着抑制。当用Navoximod处理混合细胞时，这种抑制作用显着减弱。PEG2k-Fmoc-NLG（L）在逆转肿瘤细胞的抑制作用方面也具有活性，尽管其效力略低于Navoximod。

体内

VNavoximod（NLG919）具有口服生物利用度（F> 70％）; 并具有良好的药代动力学和毒性特征。 在小鼠中，单次口服给予Navoximod可使血浆和组织Kyn的浓度降低约50％。在体内，在携带大量建立的B16F10肿瘤的小鼠中，施用Navoximod显着增强了幼稚，静息pmel-1细胞对IFA中同源hgp100肽加CpG-1826疫苗接种的抗肿瘤反应。在这种严格建立的肿瘤模型中，Navoximod plus pmel-1 /疫苗在接种后4天内产生肿瘤大小的显着崩溃（与不接受Navoximod单独接受pmel-1 /疫苗的对照动物相比，肿瘤体积减少约95％）。与替莫唑胺（TMZ）+放射治疗（RT）联合使用时，Navoximod和1-甲基-D-色氨酸（D-1MT，吲哚莫德）相对于仅用TMZ + RT治疗的小鼠，可提高生存率

NLG919溶剂和溶解度

体内：

1、逐个添加每种溶剂：10％DMSO 》40％PEG300 》5％Tween-80 》45％盐水

溶解度：≥3mg / mL（9.48 mM）; 明确解决方案

2、逐个加入每种溶剂：10％DMSO 》90％玉米油

溶解度：≥3mg / mL（9.48 mM）; 明确解决方案

3、逐个添加每种溶剂：10％DMSO 》90％（20％SBE-β-CD在盐水中）

溶解度：≥3mg / mL（9.48 mM）; 明确解决方案

NLG919的实验参考方法

细胞分析

通过体外IDO测定法测试PEG2k-Fmoc-NLG的IDO抑制作用。 简言之，将HeLa细胞以每孔5000个细胞的细胞密度接种在96孔板中并使其生长过夜。然后将重组人IFN-γ加入每个孔中，终浓度为50ng / mL。 同时，向细胞中加入各种浓度的PEG2k-Fmoc-NLG（L），PEG2k-Fmoc-NLG（S）或Navoximod（NLG919）（50nM-20μM）。 孵育48小时后，将每孔150μL上清液转移到新的96孔板中。 向每个孔中加入75μL30％三氯乙酸，并将混合物在50℃温育30分钟以将N-甲酰基犬尿氨酸水解成犬尿氨酸。 对于比色测定，将上清液转移到新的96孔板中，与等体积的Ehrlich试剂（2％对二甲氨基 - 苯甲醛w / v在冰醋酸中）混合，并在室温下孵育10分钟。 通过读板器在490nm处测量反应产物。

MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

Animal Administration

小鼠

用4％异氟烷麻醉小鼠，并用氧气中的2％异氟烷维持麻醉的手术平面。 将小鼠固定在立体定位框架中用于肿瘤植入。 简言之，将头骨剃毛并用0.5cm皮肤切口暴露。 使用防腐技术，将105个GL261细胞（悬浮在3μLRPMI-1640中）注射到右侧前囟的下列坐标（前后，-2 mm;中侧，2 mm;背腹侧） ，3毫米）。 该放置可再现地在后外侧右额叶的副皮质区域中产生肿瘤生长。 携带肿瘤的小鼠用饮用水中口服DL-1MT（2 mg / mL D-1MT与2 mg / mL L-1MT混合），饮用水中D-1MT（4 mg / mL），Navoximod（ 饮用水，腹膜内环磷酰胺，腹膜内替莫唑胺和/或全身辐射（来自137Cs源500 cGy）的6 mg / mL），详见图例。 每天观察小鼠，当它们生病或濒临死亡时处死。

MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

本文参考来源：http://www.medchemexpress.cn/Navoximod.html