一种促进人诱导多能干细胞分化为髓核样细胞的新方法|干细胞研究与治疗

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中椎间盘(IVD)的退化以早期髓核(NP)区域的细胞数量减少为特征,伴随着细胞外基质的变化、水合作用减少和进行性退化基于细胞的IVD疗法已经成为一个令人关注的领域。研究报告了各种细胞来源的再生潜力,包括自体或同种异体软骨细胞、原代IVD细胞和干细胞然而,很少有方法有明确的策略来促进NP表型,部分原因是对细胞系的明确标记和分化方法的知识有限。

发表于干细胞研究&在题为人类诱导多能干细胞分化为类髓核细胞的文章中,华盛顿大学的loria setton和他的研究小组开发了一种在体外有效地将人类诱导多能干细胞分化为类核细胞的新方法。这种分化策略源于研究人员对NP细胞的胚胎脊索细胞系的理解,以及用于在体外支持原代细胞的健康NP细胞表型的策略。

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图:工艺设计该示意图显示了未分化的hiPSC分化为NP样细胞的三个步骤

ruhang Tang等.

在未分化的hiPSC中,细胞系通过由化学成分和补充的生长因子确定的培养基以定向方式逐渐分化成中胚层和随后的脊索细胞谱系,从而促进hiPSC的NP基因表型荧光细胞成像用于检测未分化细胞中的多能标记在分化的早期,用逆转录聚合酶链反应检测潜在的细胞谱系。在分化结束时,通过免疫组织化学和组织学染色检测细胞的NP分化。为了富集脊索祖细胞,用含有转录因子短突(T)启动子和绿色荧光蛋白(GFP)荧光的报告质粒的慢病毒转导hiPSCs,然后通过流式细胞术根据GFP强度对T表达进行分类。

初始诱导后的丛生培养期可促进空泡化的核转录因子细胞形态和核转录因子表面标记物的表达,包括CD24、LMα5和碱性磷酸酶1已经证明,通过使用荧光激活细胞分选和富集短尾状核(T)阳性细胞,可以进一步提高核因子样细胞的分化效率。

人骨髓间充质干细胞有效分化为类神经营养因子细胞的能力为神经营养因子细胞的分化过程提供了新的灵感,为IVD病新疗法的开发提供了细胞来源

干细胞研究和有

doi:10.1186/s 13287-018-0797-1

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