新型冠状病毒核酸检测对临床早期检测、早期诊断、早期分离和早期治疗至关重要，是有效防控新发肺炎疫情的关键技术支撑那么，核酸检测的原理是什么？为什么有些病人没有被诊断，而是通过几个样本进行测试？我们普通人能考验自己吗？针对这些问题，记者采访了军事医学研究所副研究员康小平。问:病毒核酸检测试剂盒的原理是什么？答:由于核酸检测技术成熟且易于实施，核酸检测是目前最重要的病毒感染检测方法。这种病毒的特点是它的形状非常小，在普通光学显微镜下看不到，肉眼也无法直接观察到。然而，每种病毒都有自己独特的基因序列。通过检测患者体内的病毒核酸，可以确定患者体内是否存在病毒。现有的病毒核酸检测试剂盒大多采用荧光定量聚合酶链反应方法检测原理是以病毒独特的基因序列为检测目标，通过聚合酶链反应扩增，我们选择的目标的DNA序列呈指数增长。每个扩增的DNA序列可以与一段预先添加的荧光标记探针结合以产生荧光信号。目标基因扩增得越多，积累的荧光信号就越强。然而，在没有病毒的样品中，由于没有靶基因扩增，荧光信号增强不能被检测到。因此，核酸检测实际上是通过检测荧光信号的积累来确定样品中是否存在病毒核酸。问:病毒核酸检测试剂盒是如何开发的？答:病毒核酸检测试剂盒的一个优点是研发过程非常快，但前提是必须掌握一定数量的病毒基因序列。一旦获得病毒基因序列，就可以通过生物信息学分析确定候选核酸检测靶，并设计引物和探针。在核酸检测试剂盒的组分中，检测引物和探针是最关键的灵敏和特异的扩增引物对检测结果的准确性起着至关重要的作用。因此，通常在研发阶段设计多对引物探针，通过实验筛选出扩增效果最好的引物探针，组装在病毒核酸检测试剂盒中问:使用病毒核酸试剂盒时，我们应该注意哪些问题？答:为了预防和控制新的皇冠肺炎疫情，国家食品药品监督管理局开通了绿色通道。诊断试剂的审批速度很快，但审批流程并未简化。每种试验试剂必须完成质量检验和临床样品检验用于检验的样品对数量和类型有明确的要求。只有通过3家以上独立医疗机构的临床样本检验，且检测准确度符合临床要求，才有可能通过国家食品药品监督管理局的审批获得诊断试剂的生产批号。核酸检测结果的准确性不仅与试剂盒本身的检测准确性有关，还与检测样品采集的时间和检测样品的类型密切相关。首先，采样的时间非常重要。如果病人刚吃过饭，刷过牙，咽病毒被洗掉，那么应该收集样本。即使病毒感染了阳性患者，核酸检测也容易出现阴性结果。因此，有经验的医务人员通常要求患者在采集呼吸道样本前不要喝水或进食。测试结果还与待测样品的类型有关。同一患者在同一时间采集的不同样本将会有非常不同的检测结果。自疫情爆发以来，我直接参与了数千份临床样本的检测。在目前测试的感染新型冠状病毒的患者样本中，肺灌洗液和痰中的病毒核酸量通常高于鼻、咽和其他呼吸拭子中的病毒核酸量，而呼吸拭子中的病毒核酸量远高于血液中的病毒核酸量。此外，随着病程的不断变化，患者体内的病毒数量也在动态变化。因此，在不同的时间会有不同的采样结果，这是事实。问:为什么有些病人没有被诊断出来，而是被测试了几次？答:在当前新冠状病毒感染性疾病的诊断和治疗指南中，通过双靶核酸检测确定阳性病例为阳性。如果只有单靶核酸检测为阳性，则不能确定患者感染为阳性，但不能排除感染。因此，临床医生将根据检测结果并结合病程进行多次抽样检测。有时，核酸的阴性结果不能排除新型冠状病毒的感染，需要排除可能产生假阴性的因素，包括样品质量差、样品采集时间不当、样品储存、运输和处理不当、病毒变异等。
来源|解放军报
作者|庄，邵飞飞
期刊| 20200232
编辑:韩成
编辑:姬鹏飞
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