新冠状病毒肺炎第一版_中华医学会检验医学分会发布2019新型冠状病毒肺炎临床实验室检测的生物安全防护指南（试行第一版）

资料来源:中华医学会检验医学分会

自2019年12月以来，湖北省武汉市已发现2019例新型冠状病毒(2019-nCoV)感染者，且呈快速上升趋势。随着疫情的蔓延，中国其他地区和海外也发现了此类病例。目前，新型冠状病毒已被列入《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病，并已对甲类传染病采取了防控措施。

随着对疾病认识的加深和实验医学及微生物学经验的积累，请参考《新型冠状病毒肺炎感染的诊断和治疗方案(试行第四版)》(国卫办韩毅[2020年1月27日)第77号、《新型冠状病毒肺炎感染的防治方案(第三版)》(国卫办韩毅[2020年1月28日)及其《实验室检测技术指南》 《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》(国家卫生厅科教函2020年第70号、2020年1月23日)、《关于医疗机构开展新型冠状病毒核酸检测相关要求的通知》(国卫办[2020年第53号)、《新型冠状病毒肺炎感染防治常用医疗防护用品使用范围指南(试行)》(国卫办[2020年第75号)及此前发布的《病原微生物实验室生物安全管理规定》(国卫办 我们制定了《2019年新型冠状病毒临床实验室检测生物安全保护指南(试行1)》，指导临床实验室在实验室病毒核酸检测和常规检测中进行有效的生物安全保护。< br>

1。微生物学

2019新型冠状病毒是从人类分离的第七种冠状病毒该病毒属于β属，有包膜，其颗粒为圆形或椭圆形，通常呈多形性，直径为60~140 nm它的基因特征明显不同于传染性非典型肺炎和多囊卵巢综合征目前的研究表明，与蝙蝠传染性非典型肺炎样冠状病毒的同源性超过85%目前，已获得病毒的全基因组序列和电子显微镜照片，体外分离培养成功。

对冠状病毒物理和化学特性的理解主要来自于对SARS冠状病毒和MERS冠状病毒的研究病毒对紫外线和热敏感，脂质溶剂如56℃30分钟、乙醚、75%乙醇、含氯消毒剂、过氧乙酸和氯仿能有效灭活病毒。洗必泰不能有效灭活病毒

2、流行病学

传染源:目前，传染源主要是感染新型冠状病毒的肺炎患者潜伏期为3~7 d，一般不超过14 d(目前隔离期为14 d)大概潜伏期和携带者是传染性的。

呼吸道标本(鼻咽拭子、咳痰、吸痰、支气管肺泡灌洗液、防护刷、组织等。)含有病毒并具有传染性。有些病人，尤其是危重病人，会有病毒血症。病毒血症期间的血样具有传染性。有些病人有腹泻症状，粪便样本已被证实有病毒分离，并被视为传染性。胸腔积液是罕见的，胸腔积液样本的传染性尚未得到证实。建议将胸腔积液视为传染性。

无病毒载量信息的标本:尿液、除胸腔积液以外的其他正常无菌体液(脑脊液、心包积液、腹膜积液、后穹窿穿刺液、关节液)、腹膜渗出物、精液、女性生殖道分泌物等。目前建议将其视为传染性疾病

传播途径:目前，明确的传播途径包括呼吸道飞沫传播、气溶胶传播和接触传播除了其他传播途径外，粪便已经与病毒隔离

易感人群:一般易感人群老年人和有潜在疾病的人在感染后病情严重。儿童和婴儿也患有这种疾病。

3、病例确定

根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第四版)》，将患者分为疑似病例和确诊病例确诊病例分为普通型、重症型和危重型。对于

疑似病例和确诊病例以外的患者，本指南称为一般患者。

疑似病例和确诊病例可能很复杂或继发于其他病毒、细菌或真菌感染

4、安全原则

根据《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》，确定以下原则:

(一)新型冠状病毒暂按病原微生物危害程度分类第二类病原微生物管理

(2)病毒分离培养、动物实验等活动应在生物安全三级实验室进行实施前，须经省卫生行政部门审查，并报国家卫生委员会批准。

(3)对于未培养的感染性物质，如果它们不能被可靠地灭活，当进行诸如病毒抗原检测、血清学检测、核酸检测(建议在56℃灭活30分钟后检测)、生化分析等操作时。，它们应在生物安全二级实验室中进行，尽可能在生物安全柜中进行，而个人应采用三级生物安全保护。

5，个人生物安全

参见《新型冠状病毒感染肺炎防治常用医疗防护用品使用范围指南(试行)》(2020.1.26)

防护用品:医用外科口罩(YY0469-2011)、医用防护口罩(GB19083-2010)、N95 (NIOSH42CF R84-1995)(以下文本包括KN95[GB2626-2019)、综合呼吸保护器、防护服、隔离衣、工作服、乳胶手套、医用防护帽、护目镜、防护面罩或防护面板(以下简称面板)、鞋套和防水高统靴

一级生物安全防护:医用外科口罩、乳胶手套、工作服、手卫生、医用防护帽

二级生物安全防护:医用防护口罩或N95口罩、乳胶手套、工作服外隔离衣、医用防护帽、手卫生视情况可增加护目镜(如飞溅风险)

三级生物安全防护:医用防护口罩或N95口罩、单层或双层乳胶手套(条件允许时可选择不同颜色)、面板屏、护目镜、工作服外防护服、单层或双层医用防护帽、手卫生如有必要，双层口罩(外层:医用防护口罩，内层:N95口罩)

特殊保护:如当患者剧烈咳嗽且无呼吸障碍时，在三级保护的基础上，双层防护服、双层面罩(外层:医用防护面罩，内层:N95面罩)、综合呼吸保护装置、三层乳胶手套、双层医用防护帽等。可以使用。

保护底线:需要口罩、工作服和手套。无论任何材料或标准都可以使用。佩戴

的注意事项:佩戴外科口罩时，双手沿鼻缘紧紧按压。戴上所有面具后，确认密封；脱下时不要触摸前面。脱下防护服前，先全身喷洒消毒(如有效氯浓度为500毫克/升的消毒剂)，并按标准程序依次脱下个人生物安全防护用品。不要让内部衣物接触受污染的表面。

紫外线消毒:符合行业标准(紫外线杀菌灯GB 19258-2012)定期检测性能，记录完整，累计使用不得超过规定时限。消毒时间不得少于30分钟。

消毒剂:每天试验前后，用500毫克/升有效氯消毒剂(84消毒剂稀释100倍)或75%乙醇对桌面、桌面和地板进行消毒消毒剂新鲜制剂，不超过24 h

其他物品:①密封标本袋，透明，有生物安全标志②标本转移盒:要求常规、密封良好、有生物安全标志、方便、牢固、耐用、特殊(建议仅使用2019-nCoV标本盒)，特殊标本可加特殊标志定期清洗消毒符合要求，并有清洗消毒后才能长期保存。分动箱一般不进入隔离病房；如果从隔离病房取出，需要进行外部清洁和消毒。从医院外返回后，需要进行外部清洁和消毒。

环境:实验区符合二级或三级生物安全实验室规范核酸操作(如聚合酶链反应)合格，环境符合要求。处理气溶胶的一个好方法是打开窗户通风。按标准进行表面消毒、空气消毒等。清洁区域的严格管理除仪器维护外，我院业务(如管理、清洁)相关人员，严禁其他人员进入保持清洁区域的通风和消毒；良好的内务管理，整洁有序；相关物品应放置在不同的区域，清洗并分开，及时更换并清洗到位。

个人能力:具有相应的工作资格和岗位能力认可接受专业培训，掌握相应的技术规范、操作规程、生物安全防护知识和实际操作技能，并考试合格

个人行为:正确的手部卫生(6步或7步洗涤技巧)；抓住合适的时间洗手。不要随意触摸面部皮肤、眼睛、鼻孔和其他粘膜相关部位有人建议把长发剪短。不允许有装饰物在生活区，遵守纪律，注意保护，避免聚会(如晚餐)，不要松懈，始终保持一种保护意识。

个人心理:正确面对困难，我相信危机很快就会成功度过。医疗机构应提供相应的心理咨询，避免焦虑和抑郁

6例，样本采集

例普通患者，发热

例患者感染2019-nCoV的概率较低收集器应接受二级生物安全保护。关于

名疑似患者的诊断标准，请参见国家诊断和治疗指南。

名疑似患者被隔离并就地取样不建议检查员进入隔离区采集标本，以尽量减少患者和人员的流动为基本原则。收集器的三级生物安全保护

诊断前限于检测过程中未发现的检测项目，包括血常规、C反应蛋白和新型冠状病毒核酸检测。当血常规试验和C-反应蛋白试验未开启时，实验室人员应至少具备两级生物安全防护，核酸试验应具备三级生物安全防护。样本按照(3)进行处理

例确诊病例

1例。测试项目

与诊所沟通并达成共识，只进行必要的测试项目；尽可能少做手工项目测试

2。风险

来自呼吸道的液滴或气溶胶以及来自呼吸道和其他部位的样本对采集者构成传播威胁接触病人的皮肤、衣物和日用品，接触标本本身，就有接触传播的危险

3。工艺

收集器应接受三级生物安全保护患者需要戴口罩或其他呼吸屏障，以避免咳嗽、呼吸道诊断和治疗等。

收购过程必须考虑安全和目标在达到目标的情况下，应尽量减少接触，尽可能避免产生气溶胶和液滴，尽可能缩短床的停留时间。当

名患者自主完成痰液和粪便样本的采集时，医生或护士会在给出指示后立即退出。

实验室应对接收和处理标本进行三级生物安全保护，人工检测项目在生物安全柜内进行。

如果相应的医疗机构同时处理普通患者，疑似或确诊患者的标本应有特殊标识(以下简称XG)

7、标本包装、交接、

交接、

接收如果相应医疗机构同时处理普通患者，XG标本交接箱应有特殊标识

收集器或助手将样本装入密封袋中，并将其放入样本转移箱中，以保持其直立在转移箱关闭前，需进行紫外线消毒(如不紧急)、含氯消毒剂或乙醇喷雾消毒。XG样品应单独运输，不得与其他物品混合。

包装可在运输车前完成交接。达成默契后，也可以由一方单独完成。

运输人员:穿戴工作服、医用帽、手术口罩、手套，并有清晰的标识将标本转移箱和相关信息(如申请表)安全送到实验室。在此期间，转移箱应保持稳定，样品不应直立，避免严重的冲击和湍流。不要自己打开分动箱。如果在

外部转送:申请转送，经批准后送至中国疾病预防控制中心实验室。运输工具的安全保护与以前相同。司机戴着手术口罩或N95口罩在医院使用专用车辆如果是空运，则运输包属于a类，并受相关法规管辖。

实验室接待人员:穿戴工作服、医用帽、手术口罩或N95口罩、塑料手套接收时，确认运输车的标识和分动箱的特殊标识。如果没有标识，XG样本将被拒绝。包装前确保有消毒环节。如果确定没有消毒，不能确定是否消毒，怀疑消毒不到位，可以在开箱的瞬间，进行乙醇喷雾消毒

8、样品分选、离心，送至

接收、分选、离心疑似或确诊患者样品，操作者必须进行二级生物安全防护如遇特殊情况(如疑似泄漏)，应升级为三级生物安全防护。从密封袋中取出

份样品后，需进行紫外线消毒或75%乙醇喷雾消毒。当

样本被离心时，操作者不能离开离心机。如果有疑似事故，如离心过程中的异常噪音，停止离心。转到三级生物安全保护后，停止离心30分钟以上，小心打开盖子，喷洒75%乙醇进行消毒，然后进行处理。将离心管尽可能多地放入和取出生物安全柜中的转子

个样本的离心不是意外的。停止离心10分钟以上，打开离心机盖进行喷雾消毒。根据检测项目和工作分工，将标本送至相应实验区操作台的“未检验标本”区。

和标本检验的共同原则

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。如果在操作过程中不需要打开试管塞(如真空采血管帽),应进行二次生物安全保护

如果操作时必须打开试管塞，或可能产生气溶胶，或可能接触到样品本身，应进行三级生物安全保护

尽量避免打开试管塞，同时轻轻缓慢地打开，与操作者的面部保持一定距离。尽可能缩短开放时间尽可能避免产生气溶胶。如果可能，喷洒消毒操作应尽可能在生物安全柜中进行。如果试管塞子打开或可能产生气溶胶，必须在生物安全柜中进行。

打开管塞后，如有可能，消毒后取下盖子。

高风险

①直接接触XG样本本身可能导致接触传播②XG样品核酸扩增试验的处理和扩增③疑似和确诊患者呼吸道分泌物涂片和培养时易产生气溶胶这三个是高风险过程。需要三级生物安全保护和生物安全柜操作。当

直接接触XG样品本身时，如果戴上双手套，可以及时更换。如果有飞溅，请尽快更换。

核酸检测实验室符合《关于医疗机构开展新型冠状病毒核酸检测相关要求的通知》(国卫办韩毅[〔2020〕53号)的要求样品可以在核酸扩增前消毒包括在56℃孵育30分钟，加入蛋白酶k用胰蛋白酶或4%氢氧化钠治疗粘液痰时，避免使用气雾剂。保持环境的有效负压(如果条件允许)，及时稀释和去除气溶胶安全柜内应使用

分泌物涂片。涂层后需要紫外线照射30分钟。

标本培养相关操作(液化、振荡、涂布、标记等。)必须在安全柜中完成根据培养皿的生长情况，建议在安全柜中进行。

低风险

非XG样本、XG样本绝对不打开塞子、不产生气溶胶等。，低风险

为二级生物安全保护如果条件允许，建议操作生物安全柜。

不确定度

自动血细胞分析仪、自动凝血分析仪、自动化学检测器、自动免疫检测器等的风险。在检测XG样品的过程中，存在产生气溶胶的风险此时，飞溅和气溶胶产生的时间和强度是不确定的，无法评估。建议对

例确诊患者的XG标本进行三级生物安全保护。患者的疑似XG标本可接受二级生物安全保护或在此基础上进行适度强化。

十、

试件检验后密封

血等样品应重新密封或插入(新的)生物安全柜中，并按规定保存。如果

直接高压灭菌，必须用塑料薄膜覆盖。高压灭菌前，如果储存时间长，必须喷洒消毒剂并储存。

份标本均按照生物安全原则和感染管理标准带出科室关于废物管理，请参考新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)

11、实验室生物安全

误操作或意外处理

(1) XG标本污染生物安全柜操作台，造成有限污染:使用有效氯含量为5500毫克/升的消毒剂，消毒30分钟以上；现在需要准备消毒液，并在24小时内使用。

(2) XG标本造成实验室污染:保持实验室空间封闭，避免无关人员进出，避免污染物扩散使用浸有5500毫克/升有效氯消毒剂的毛巾覆盖污染区域，并消毒30分钟以上。必要时(例如，在大量溢出的情况下)，可以使用过氧乙酸以2 g/m的剂量加热熏蒸实验室，并熏蒸过夜。或将20克/升过氧乙酸消毒剂以8毫升/米的量用喷雾器喷洒1-2小时熏蒸时，室内湿度为60%~80%

(3)清理污染物严格遵循活病毒生物安全操作要求，采用压力蒸汽灭菌，并进行实验室通风，防止二次危害。

详见“新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)”