质粒转化大肠杆菌影响转化率因素_质粒转化大肠杆菌原理

①生长时期:实验发现在对数中期的大肠杆菌易生成感受态.转化时菌浓度应控制在不超此后到66kb转化效率线性下降.同时,开环状质粒只有超螺旋质粒转化率的75%,线型质粒

影响转化效率的因素很多,主要有:感受态细胞制备的质量、受体菌生长期(大肠杆菌在对数生长期易产生感受态)、质粒的大小和构型、所用试剂的纯度、接种前菌种的保藏方式

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大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理及注意事项 1 、感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后必须导入特定的宿主 (受体细胞) 使之无性繁殖并高效表达外源基因或

一个看大肠杆 菌的生长情况,最好用处于对数期的来制备感受态。再者,不论是用Ca离子还是电击,这时的大肠杆菌是处于一种病态的状况,很容易死掉,所以离心的转速要小点,用枪吹打时不要太剧烈。另外在混合前最好先把质粒放到42℃水浴锅里预热10分钟,这样效果应该会好点。希望对你有用。

大肠杆菌感受态细胞转化能力影响因素的研究 janly512|2010-09-20 |举报感受态方面的文献专业文档专业文档是百度文库认证用户/机构上传的专业性文档,文库VIP用户或购买

保持较高的转化率至关重要。影响转化率的因素很多,其中包括: 1)载体DNA及重组DNA 而且应与所转化的载体DNA性质相匹配,如pBR322转化大肠杆菌JM83株,其转化率不高

1.细菌的生长状态和密度:OD006=0.3~0.5 细菌出于对数期或者对数前期 2.质粒DNA:数量:质粒DNA不超过感受态细胞体积的5% 大小:分子量越大转化效率越低,超过30Kb的质粒DNA很难转化成功构型:超螺旋的DNA具有较高的转化效率,重组DNA效率低一些,环状DNA相比线性DNA转化效率高一些 3.所用试剂纯度、质量、器皿的洁净程度 4.防止杂菌和其他外源DNA的污染

影响转化效率的因素很多,主要有:感受态细胞制备的质量、受体菌生长期(大肠杆菌在对数生长期易产生感受态)、质粒的大小和构型、所用试剂的纯度、接种前菌种